|
Вторичные светофильтры подбирают в зависимости от спектральных характеристик флуоресцентных излучений веществ. Вводя соответствующие светофильтры, можно один и тот же метр использовать для исследования различных флуоресцирующих веществ. Применение селенового фотоэлемента как преобразователя световой энергии в электрическую позволяет от сравнения интенсивности свечения фотоэлемента перейти к сравнению электродвижущих сил. Теоретическое обоснование. Витамин (тиамин) и (рибофлавин)
находятся в молоке в свободном и связанном состоянии, при облучении ультрафиолетовыми лучами не показывает заметной флуоресценции. Окислением железосинеродистым калием его переводят в тихом, спиртовые растворы которого под влиянием ультрафиолетового облучения дают сине-голубую флуоресценцию, количественно измеряемую. При облучении ультрафиолетовыми лучами витамина проявляется желто-зеленая флуоресценция. Методика определения. В мерную колбу на 100 мл вносят 80 мл молока (лучше сепарированного) и доводят до 4—4,5, добавляя около 0,2 мл концентрированной. После смешивания в колбу вносят 1 мл толуола и производят ферментативный гидролиз, выдерживая колбу в термостате при температуре 37—40° С в течение 13—15 ч. Охлаждают и фильтруют в мерную колбу на 100 мл. Осадок на фильтре 2—3 раза промывают водой, собирая ее в ту же колбу и допивают воду до метки. В фильтрате определяют тиамин и рибофлавин.
|