| Высота столбиков содержащие белок |
|
Высота столбиков, относящихся к таким полоскам, не содержащим белка, усредняется. Принимается, что она соответствует отсутствию белка, поэтому высота всех остальных столбиков отсчитывается от этого нулевого значения. Обезжиренное молоко нагревают до 40° С и казеин осаждают 1 н. раствором уксусной кислоты. Отстоявшуюся сыворотку фильтруют через бумажный складчатый фильтр и нейтрализуют 1 н. раствором аммиака до рН 6,5 (по индикаторной бумажке). Добавляют на 100 мл сыворотки 70 г сухого кристаллического сернокислого аммония, тщательно перемешивают до полного растворения его. Осажденные белки отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр. Оставшийся на фильтре белковый слой снимают осторожно шпателем и переносят в целлофановый мешочек, который погружают в стакан с дистиллированной водой и помешают в холодильник при температуре 8 — 10° С. Диализ против дистиллированной воды проводят 24 ч при частой смене ее и 24 ч против буфера, но не содержащего мочевины (реактив 86). Диализ можно проводить только против дистиллированной воды. В мешочке образуется раствор сывороточных белков. Его фильтруют через бактериальный фильтр и подвергают электрофорезу на бумаге, как раствор казеина. |


