|
Точной пипеткой отбирают 0,1 0,5 мл полученного раствора, переносят его на бумагу размером 6 см, высушивают ее в токе теплого воздуха. Высушенную бумагу проводят через растворитель, состоящий из бутанола, ледяной уксусной кислоты и воды в соотношении 4:1:4. Бумагу просушивают 1 ч на воздухе, обрызгивают ее 0,5% раствором (реактив 109), слегка подсушивают и помещают на 15 мин. в сушильный шкаф с температурой
90° С. После этого бумагу смачивают раствором азотнокислой меди и выдерживают 20 мин. в темном месте для закрепления окраски, во время которого бумажка подсыхает. Бумагу разрезают на тонкие полоски, переносят в пробирку с пробкой, заливают 10 мл 80% спирта и оставляют на 1 ч, несколько раз перемешивая массу. Окрашенный раствор в кювете емкостью 10 мм в колориметре при длине волны 500 нм с зеленым светофильтром. Количество азота свободных аминокислот в 100 г сыра вычисляют по формуле. Сравнение показателя оптической плотности ведут с 80% спиртом. В растворах с небольшим количеством свободных аминокислот или других веществ, подлежащих разделению, используют круговую хроматографию, так как в противном случае осаждающиеся на бумаге вещества наслаиваются и затрудняют разделение. Метод пригоден для исследования очень молодого сыра, для сливочного масла. Резкость разделения лучше, чем при других методах бумажной хроматографии.
|