Проникая в колонку, кислоты адсорбируются на силикагеле. Степень адсорбции различных кислот неодинакова, высокомолекулярные кислоты (валерьяновая, капроновая и т. д.) адсорбируются слабо и вымываются из колонки первыми порциями растворителя, поэтому титровать отмеренные сифоном порции растворителя следует сразу, как только раствор кислот будет помещен в колонку. При вхождении кислот в колонку цвет верхней части колонки переходит из синего в желтый, а затем при разделении кислот появляются слои зеленого цвета различных оттенков. Для титрования используют 0,02 н. раствор едкого натра в воде или в метиловом спирте с индикатором фенолфталеином. Результаты титрования каждой порции записывают в определенной последовательности. Растворителем вымываются валерьяновая и более высокомолекулярные кислоты. Для вымывания масляной кислот требуется 10% раствор бутанола в хлороформе, уксусной кислоты— 30% раствор бутанола, муравьиной кислоты — 50% раствор бутанола в хлороформе. Валерьяновая и более высокомолекулярные кислоты на колонке не разделяются и в результате титрования дают суммарную цифру, образуя на графике одну общую вершину при титровании первых порций растворителя. После вымывания высокомолекулярных кислот вытекающий из колонки растворитель не содержит кислот, и на графике отмечается крутое падение кривой. С этого момента используют растворитель, который вымывает масляную и затем кислоту, на графике образуются две рядом стоящие вершины.