Интересные статьи
Нужно знать
Наши партнеры
| Излишки раствора |
|
Конец чистого предметного стекла шириной 2,5 см погружают в исследуемый раствор, дают стечь излишкам раствора и прикладывают край стекла под некоторым углом к стартовой черте, оставляя в таком положении на несколько секунд, чтобы раствор мог перейти на полоску. Затем заряжают Электра камеру. Вынув штатив, помещают полоски бумаги так, чтобы на полочках, огибая перемычку, они располагаются одна на другой. Концы полосок совмещают. Помещают штатив с полосками бумаги в Электра камеру, концы бумажек должны быть погружены в раствор буфера. Закрывают камеру крышкой, запирают и включают ток. Регулятор напряжения устанавливают на 200 в, включают миллиамперметр. Напряжение тока должно составлять 250—320 е, продолжительность электрофореза — 16—18 ч, сила тока 0,5—0,7 мА на каждую полоску. По окончании электрофоретического разделения ток выключают, снимают крышку с камеры и высушивают бумажные полоски в сушильном шкафу 10— 20 мин при температуре 105° С, подвешивая их за концы зажимами или на специальном штативе. После высушивания полоски бумаги окрашивают раствором бром фенолового синего, погружая их в эмалированную ванночку с красителем. Через 20 мин раствор красителя сливают. Полоски бумаги промывают несколько раз 5% раствором уксусной кислоты, пока промывная жидкость и участки бумаги, не содержащие белка, не станут совершенно бесцветными. Вынув полоски из ванночки, их высушивают в сушильном шкафу при температуре 105° С. Для отчетливой видимости окрашенных пятен белковых фракций электрофоре-грамму держат несколько секунд над раскрытой банкой с концентрированным раствором аммиака. |


