По полученным данным вычерчивают калибровочный график, откладывая по оси ординат найденное значение оптической плотности, по оси абсцисс — соответствующие количества витамина А в интернациональных единицах. Калибровочный график должен представлять собой прямую линию. Если в каком-либо месте ее наблюдается изгиб к оси абсцисс, то следует составить новый график. Пробы молока готовят как при определении содержания витамина А в молоке визуальным методом, вплоть до растворения не омыляемого осадка молока (из эфирной вытяжки) в хлороформе. Затем ведут, как указано при установлении оптической плотности для калибровочного графика. Концентрация витамина должна быть такой, чтобы отсчет был в пределах 40—65 делений шкалы, поэтому количество хлороформа для растворения витамина регулируют. Зная оптическую плотность исследуемого раствора, находят по калибровочному графику соответствующее содержание витамина. В коническую колбу с пришлифованной пробкой емкостью 400—500 мл, соединенную с обратным холодильником, отмеривают 20 мл молока, прибавляют 100 мл 1 н. раствора, нагревают на кипящей водяной бане 1 ч. Раствор охлаждают и нейтрализуют 20% раствором по универсальной индикаторной бумажке, затем прибавляют при перемешивании 100 мл 96% этилового спирта. Осадок отфильтровывают на воронке с отсасыванием. Прозрачный фильтрат обрабатывают 2 г асканита (адсорбента никотиновой кислоты), встряхивая 3 мин. Асканит отфильтровывают на маленькой воронке через бумажный фильтр. Фильтр с асканитом переносят в колбу, в которой обрабатывали раствор, и него никотиновую кислоту встряхиванием с 25 мл 1 н. раствора 3 мин. Смесь переносят в пробирку и центрифугируют.