Затем прибавляют 5 мл известкового молока, доводят водой до метки и вносят еще 0,2 мл (учитывая возможность испарения) воды. Перемешивают и выдерживают при температуре 45—47° С в течение 10 мин, охлаждают и фильтруют. Если фильтрат содержит в 1 мл больше 10 мг молочной кислоты, его разводят в 10 раз. Покраснение фильтр, исчезающее при добавлении, определению не мешает. К 1 мл фильтрата, содержащего менее 10 мкг молочной кислоты, в пробирке из прочного стекла прибавляют каплю 5% раствора, что способствует максимальному развитию окраски (фиолетовый цвет) и из бюретки точно 6 мл концентрированной. Пробирку помещают в кипящую воду на 5 мин, охлаждают до 20° С в ледяной воде. Затем прибавляют 2 капли раствора, тщательно смешивают, чтобы обеспечить мелкую суспензию реактива, который не растворим в кислоте. Смесь выдерживают 15 мин при 30°, после хорошего перемешивания прибавляют еще каплю реактива и выдерживают еще 15 мин при 30° С. Пробирки переносят на 90 сек в кипящую водяную баню для растворения взвеси реактива, затем охлаждают в ледяной воде до температуры 18—20° С и с фильтром 560 им. При пользовании фотоколориметром его калибруют по общим правилам с различными разведениями молочной кислоты.