Общее количество фосфора в молоке 10 мл молока вносят в мерную колбу на 100 мл и доводят водой до метки: 3 мл разведенного в 10 раз молока минерализуют в маленькой колбе, прибавляют 2 мл смеси концентрированной серной и азотной кислот, маленькую бусинку (для равномерного кипения). Содержимое колбы сжигают сначала на слабом огне, затем усиливая нагревание, но не допуская вспенивания. Когда прекратится выделение бурых паров окислов азота, колбу охлаждают и из капельной воронки, помещенной над колбой, осторожно добавляют 4—5 капель концентрированной. Жидкость нагревают до тех пор, пока она не сделается прозрачной, бесцветной или чуть-чуть желтоватой. Затем жидкость охлаждают, прибавляют 5 мл дистиллированной воды, кипятят для удаления остатков окислов азота 3—5 мин и вновь охлаждают. Жидкость количественно переводят в мерную колбу на 100 мл, ополаскивают колбу небольшими порциями воды, сливая ее в ту же мерную колбу, добавляют воду до половины колбы. Раствор нейтрализуют, осторожно приливая 10% раствор при индикаторе фенолфталеине, до появления разовой окраски. Затем подкисляют несколькими каплями разведенной серной кислоты до обесцвечивания жидкости и доводят водой до 100 мл. 5 мл этого раствора переносят в мерную колбу на 50 мл и последовательно прибавляют 1 мл раствора аммония. Раствор окрашивается в синий цвет, достигая максимума через 20 —30 мин. По калибровочному графику находят соответствующее количество фосфора. Для построения калибровочного графика в мерные колбы на 50 мл вносят пипеткой 2, 4, 6, 8 и 10 мл раствора, что соответствует 20, 40, 60, 80 и 100 мкг фосфора.