Через 25 мин нагревания при 0,5° С, считая с момента опускания образца в 6,6% раствор в этиленгликоле, пробирки вынимают и быстро охлаждают, поместив в сосуд с холодной водой. Содержимое пробирок количественно переносят в мерные колбы па 100 мл с притертыми пробками и доводят до метки этиловым спиртом (оптической чистоты). После этого колбы оставляют в холодильнике при температуре около 4° С на 10—12 ч.Затем содержимое колб нагревают до 18—20 С, фильтруют через бумажный фильтр, разводят до нужной концентрации этиловым спиртом. На спектрофотометре измеряют оптическую плотность или процент пропускания исследуемого раствора. Разведения желательны такие, чтобы оптическая плотность измеряемых растворов находилась в пределах 0,2 -0,8. При расчете вносят поправки. В коэффициенте удельного погашения при 233 нм учитывают постоянную поправку 0,03, зависящую от поглощения карбоксильных групп. Коэффициенты удельного погашения при 268 и 315 нм исправляют на абсорбцию фона. В пробирку емкостью 40 мл отмеривают 10 мл молока, добавляют 5 мл реактива и хорошо смешивают. Пробирку помещают на 10 мин в кипящую водяную баню, затем охлаждают в холодной воде. В пробирку прибавляют 15 мл экстракционной смеси, пробирку тщательно закрывают пробкой, энергично встряхивают не менее 30 сек и центрифугируют 5 мин.